Interference of blood storage containing K2EDTA and K3EDTA anticoagulants in the automated analysis of the hemogram / Interferência da estocagem de sangue contendo os anticoagulantes K2EDTA e K3EDTA na análise automatizada do hemograma

ABSTRACT Introduction: The present work evaluated the possible alterations in different hemogram parameters as: total erythrocyte count, hematocrit, leukocyte, and platelet count, against different times of sample storage at refrigerated and room temperature towards the effects of anticoagulants that can affect the variation of laboratory results. Objective: Compare variations in automated hemogram analysis, with blood collected in tubes containing dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid (K2EDTA) and tripotassium ethylenediaminetetraacetic acid (K3EDTA). Material and methods: A comparative study was carried out on differential leukocyte count and absolute leukocyte count, hemoglobin determination and red blood cell count and platelet count. Therefore, it researches the anticoagulant that brings less interferences in hemogram analysis according to storage, at temperatures from 2°C to 8°C and 25°C (room temperature), and the time window between collection and analysis (4, 6, and 8 hours). These determinations were carried out after homogenization from five to eight inversions using the automated device Sysmex XN-1000TM. Eighteen biological samples of venous blood were collected, used as control, from patients aged 18 and over that did not have any hematologic disease. Results: The results were evaluated through descriptive statistical analysis, and comparison of mean values through the analysis of variance (Anova). In accordance with the results presented, there were not changes in the parameters by refrigerating the sample in the period of 8 hours, except for the platelet count, presenting oscillations when stored under refrigeration from 2°C to 8°C. Conclusion: At room temperature, the parameters mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), and hematocrit presented significant statistical differences.

RESUMEN Introducción: Este trabajo evaluó los posibles cambios en diferentes parámetros del hemograma, como conteo de eritrocitos totales, leucocitos, hematocrito y plaquetas, con respecto a diferentes tiempos de almacenamiento de la muestra en ambiente refrigerado y temperatura ambiente en cuanto a los efectos de los anticoagulantes, que pueden afectar los resultados del análisis de laboratorio. Objetivo: Comparar los cambios presentes en el análisis del hemograma automatizado, recogido en tubos que contienen ácido etilendiaminotetraacético dipotásico (K2EDTA) y tripotásico (K3EDTA). Material y método: Estudio comparativo realizado para conteo diferencial/absoluto de leucocitos, determinación de hemoglobina y conteo de eritrocitos y plaquetas, a fin de investigar el anticoagulante que trae menos interferencia en el análisis del hemograma según su almacenamiento - temperatura de 2°C a 8°C y 25°C (temperatura ambiente) y ventana de tiempo entre recuento y análisis de 4, 6, y 8 horas. Se realizaron las determinaciones luego de homogeneizar las muestras con cinco a ocho inversiones en el analizador automatizado Sysmex XN-1000TM. Dieciocho muestras de sangre venosa de pacientes mayores de 18 años, sin enfermedades hematológicas, fueron recogidas y usadas como control. Resultados: Se evaluaron los resultados mediante un análisis descriptivo, con comparación de medias por análisis de la varianza (Anova). De acuerdo con los resultados, no hubo cambios en los parámetros enfriándose la muestra en el período de 8 horas, a excepción del recuento de plaquetas, que presentó oscilaciones bajo refrigeración (2°C-8°C). Conclusión: A temperatura ambiente, los parámetros volumen corpuscular medio (VCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM) y hematocrito presentan diferencia estadísticamente significativa.

RESUMO Introdução: O presente trabalho avaliou as possíveis alterações em diferentes parâmetros do hemograma, como contagem de eritrócitos totais, leucócitos, hematócrito e plaquetas, em relação a diferentes tempos de armazenamento da amostra em ambiente refrigerado e em temperatura ambiente quanto aos efeitos dos anticoagulantes, que podem afetar a variabilidade de seus resultados laboratoriais. Objetivo: Comparar as variações presentes na análise do hemograma automatizado, colhido nos tubos contendo ácido etilenodiamino tetra-acético dipotássico (K2EDTA) e tripotássico (K3EDTA). Material e métodos: Estudo comparativo realizado para contagem diferencial/absoluta dos leucócitos, determinação de hemoglobina e contagem de hemácias e plaquetas, com o intuito de investigar o anticoagulante que traz menos interferentes na análise do hemograma de acordo com sua estocagem - temperatura de 2°C a 8°C e 25°C (temperatura ambiente) e janela de tempo entre a coleta e a análise de 4, 6 e 8 horas. Essas determinações foram realizadas após homogeneização de cinco a oito inversões pelo aparelho automatizado Sysmex XN-1000TM. Dezoito amostras biológicas de sangue venoso de pacientes com idade superior a 18 anos, sem doenças hematológicas, foram coletadas e utilizadas como controle. Resultados: Os resultados foram avaliados por meio de uma análise estatística descritiva, com comparação de médias através da análise de variância (Anova). De acordo com os resultados apresentados, não ocorreram alterações nos parâmetros ao refrigerar a amostra no período de 8 horas, com exceção da contagem de plaquetas, que apresentou oscilações quando armazenadas sob refrigeração de 2°C a 8°C. Conclusão: Na temperatura ambiente, os parâmetros volume corpuscular médio (VCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e hematócrito apresentaram diferença estatística significante.

The importance of homocysteine levels in the prognosis of patients with chronic renal disease and in hemodialysis patients / Importância dos níveis de homocisteína no prognóstico de pacientes com doença renal crônica e em pacientes em hemodiálise

ABSTRACT Introduction: Homocysteine (Hcy) is one of the metabolites of methionine (Met), an essential diet-derived amino acid. There is a close relationship between high plasma Hcy levels and declining renal function. Plasma and urinary Hcy level has been the target of studies as a biomarker that forecasts poor outcome in renal patients and in hemodialysis patients. This review evaluates the main studies that sought to correlate Hcy and poor prognosis in renal disease as well as the treatments proposed for the reduction of plasma Hcy levels in these patients. Conclusion: Hcy could be an important biomarker of renal disease progression mainly in hemodialysis patients. We emphasize the importance of normalizing plasma levels of this amino acid to ensure a better prognosis in kidney disease.

RESUMO Introdução: A homocisteína (Hcy) é um dos metabólitos da metionina (Met), um aminoácido essencial proveniente da dieta. Existe uma estreita relação entre os altos níveis plasmáticos de Hcy e o declínio da função renal. A Hcy plasmática e urinária tem sido alvo de estudos como um biomarcador capaz de sinalizar o prognóstico em doentes renais e em pacientes em hemodiálise. Esta revisão avalia os principais estudos que buscaram correlacionar a Hcy e o prognóstico da doença renal e descreve os tratamentos propostos para a redução dos níveis plasmáticos de Hcy nesses pacientes. Conclusão: A Hcy pode ser um biomarcador da progressão na doença renal, principalmente em pacientes hemodialíticos. Ressaltamos a importância da normalização dos níveis plasmáticos desse aminoácido para garantir um melhor prognóstico na doença renal.

What Is Different in the Population of the Brazilian Amazon Region so that They Have a Low Frequency of KRAS Gene Mutations?

BACKGROUND: Colorectal cancer (CRC) has been described in the medical literature as resulting from many forms of interaction between lifestyle, genetics, and geographical origin. Genetically, the KRAS gene has a negative impact on the general survival and prognosis of patients when mutated. METHODS: This study was conducted in Brazil and included information about 60 patients with CRC stage III and IV examined at the Day Hospital Oncológica do Brasil, whose DNA was analyzed with the PCR-DNA method to determine the existence of a KRAS mutation. RESULTS: The results revealed that 18.3% of the individuals analyzed showed a KRAS mutation (24% of mutations were found in men and 14.3% in women), which is a smaller proportion than those found in other large studies across the globe. CONCLUSION: As our analysis is one of the very first published about this topic, more studies are necessary to understand the role of KRAS mutations and the associated variables in populations such as that of the Amazon region.

Plasma concentrations of retinol in obese children and adolescents: relationship to metabolic syndrome components.

OBJECTIVE: To evaluate obese children and adolescents' retinol plasma levels and to correlate them with metabolic syndrome components. METHODS: Cross-sectional study with 61 obese children and adolescents (body mass index Z score - ZBMI>+2). Pubertal development, arterial blood pressure, body weight and height for nutritional classification and waist circumference were obtained. A 15 mL blood sample was collected (after a 12-hour fasting in a low luminosity room) for retinol determination (cut-off inadequate if <30 µg/dL), lipid profile (HDL-c, LDL-c, and triglycerides), oral glucose tolerance test (fasting and 120 minutes) and for high sensitivity C-reactive protein. Spearman correlation and multiple linear regression were used in the statistical analysis. RESULTS: Mean age was 10.7±2.7 years. There was a predominance of male gender 38/61 (62%) and pre-pubertal 35/61 (57%) subjects. The average plasmatic retinol was 48.5±18.6 ug/dL. Retinol deficiency and severe obesity were observed in 6/61 (10%) and 36/61 (59%), respectively. Glucose level at 120 minutes was the independent and predictive variable of plasma retinol levels [ß=-0.286 (95%CI -0.013 - -0.001)]. CONCLUSIONS: An independent and inverse association between plasma retinol levels and glucose tolerance was observed, suggesting an important contribution of this vitamin in the morbidities associated to obesity in children and adolescents.

Plasma concentrations of retinol in obese children and adolescents: relationship to metabolic syndrome components / Concentraciones plasmaticas de retinol en ninos y adolescentes obesos: relacion con componentes del sindrome metabolico / Concentracoes plasmaticas de retinol em criancas e adolescentes obesos: relacao com componentes da sindrome metabolica

Objective: To evaluate obese children and adolescents' retinol plasma levels and to correlate them with metabolic syndrome components. Methods: Cross-sectional study with 61 obese children and adolescents (body mass index Z score - ZBMI>+2). Pubertal development, arterial blood pressure, body weight and height for nutritional classification and waist circumference were obtained. A 15mL blood sample was collected (after a 12-hour fasting in a low luminosity room) for retinol determination (cut-off inadequate if <30µg/dL), lipid profile (HDL-c, LDL-c, and triglycerides), oral glucose tolerance test (fasting and 120 minutes) and for high sensitivity C-reactive protein. Spearman correlation and multiple linear regression were used in the statistical analysis. Results: Mean age was 10.7±2.7 years. There was a predominance of male gender 38/61 (62%) and pre-pubertal 35/61 (57%) subjects. The average plasmatic retinol was 48.5±18.6ug/dL. Retinol deficiency and severe obesity were observed in 6/61 (10%) and 36/61 (59%), respectively. Glucose level at 120 minutes was the independent and predictive variable of plasma retinol levels [β=-0.286 (95%CI -0.013 - -0.001)]. Conclusions: An independent and inverse association between plasma retinol levels and glucose tolerance was observed, suggesting an important contribution of this vitamin in the morbidities associated to obesity in children and adolescents. .

Objetivo: Evaluar las concentraciones plasmáticas de retinol en niños y adolescentes obesos y relacionarlas con componentes del síndrome metabólico. Métodos: Mediante estudio transversal, se evaluaron 61 niños y adolescentes obesos (escore Z del índice de masa corpórea - ZIMC>+2). Se obtuvieron datos de estadiamento puberal, presión arterial sistémica, peso y estatura para clasificación de la condición nutricional y cintura abdominal. Se recogieron 15mL de sangre (después de 12 horas de ayuno y en sala con baja luminosidad) para verificación de dosis de retinol (punto de corte inadecuado si <30µg/dL), para el perfil lipídico (HDL-c, LDL-c y triglicéridos), para la prueba de tolerancia oral a la glucosa (ayuno y 120 minutos) y para proteína C-reactiva ultrasensible. La correlación de Spearman y la regresión lineal múltiple fueron utilizadas para el análisis estadístico. Resultados: El promedio de edad de los niños estudiados fue de 10,7±2,7 años, con predominancia del género masculino 38/61 (62,3%) y los prepúberes 35/61 (57,4%). El promedio de retinol plasmático fue de 48,5±18,6µg/dL. Se observaron deficiencia de retinol y obesidad grave en 6/61 (9,8%) y 36/61 (59%), respectivamente. La glucemia a los 120 minutos fue la variable independiente y predictiva de la concentración plasmática de retinol -β=-0,286 (IC95% -0,013; - 0,001). Conclusiones: Hubo asociación independiente e inversa entre el retinol plasmático y la tolerancia a la glucosa, lo que sugiere la importancia de esa vitamina en las morbilidades asociadas a la obesidad, en niños y adolescentes. .

Objetivo: Avaliar as concentrações plasmáticas de retinol em crianças e adolescentes obesos e relacioná-las com componentes da síndrome metabólica. Métodos: Por meio de estudo transversal, avaliaram-se 61 crianças e adolescentes obesos (escore Z do índice de massa corpórea - ZIMC>+2). Obtiveram-se os dados de estadiamento puberal, pressão arterial sistêmica, peso e estatura para classificação da condição nutricional e cintura abdominal. Coletaram-se 15mL de sangue (após 12 horas de jejum e em sala de baixa luminosidade) para a dosagem do retinol (ponto de corte inadequado se <30µg/dL), para o perfil lipídico (HDL-c, LDL-c e triglicérides), para o teste de tolerância oral à glicose (jejum e 120 minutos) e para a proteína C-reativa ultrassensível. A correlação de Spearman e a regressão linear múltipla foram utilizadas para a análise estatística. Resultados: A média de idade das crianças estudadas foi de 10,7±2,7 anos, predominando-se o gênero masculino 38/61 (62%) e os pré-púberes 35/61 (57%). A média do retinol plasmático foi de 48,5±18,6ug/dL. Observaram-se deficiência de retinol e obesidade grave em 6/61 (10%) e 36/61 (59%), respectivamente. A glicemia aos 120 minutos foi a variável independente e preditora da concentração plasmática de retinol [β=-0,286 (IC95% -0,013 - -0,001)]. Conclusões: Houve associação independente e inversa entre o retinol plasmático e a tolerância à glicose, o que sugere a importância dessa vitamina nas morbidades associadas à obesidade, em crianças e adolescentes. .

Doença hepática gordurosa não alcoólica em escolares obesos / Nonalcoholic fatty liver disease in obese children

OBJETIVO: Avaliar a prevalência de alterações hepáticas ao ultra-som e de elevação da alanina aminotransferase (ALT) em crianças com sobrepeso e obesidade, além de relacionar a presença de alterações com peroxidação lipídica, perfil lipídico e resistência insulínica. MÉTODOS: Estudo transversal, prospectivo e controlado de 67 crianças com sobrepeso/obesidade (38 do sexo feminino e média de idade de 8,6 anos), pareadas por sexo e idade com 65 eutróficas. A avaliação bioquímica consistiu de perfil lipídico (LDL-c, HDL-c e triglicerídeos); ALT; substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS); glicemia e insulina, utilizadas para o cálculo do Homeostasis Model Assessment Insulin Resistance (HOMA-IR). A esteatose hepática, avaliada por ultra-sonografia por um único examinador, foi classificada em difusa leve, moderada e grave. RESULTADOS: Elevação de ALT (>40U/L) foi encontrada em 3 por cento e alterações ultra-sonográficas do fígado em 57,4 por cento das crianças com sobrepeso e obesidade. O Grupo Sobrepeso/Obesidade apresentou maior percentual de ALT >18U/L (OR 4,2; p=0,0006) e de hipertrigliceridemia (OR 4,2; p<0,001), em relação ao controle. A ALT associou-se com aumento de triglicerídeos séricos (OR 3,2; p=0,010). Não houve associação entre os níveis de TBARS (estresse oxidativo) e do HOMA-IR com a presença de sobrepeso/obesidade, nem com ALT >18U/L. CONCLUSÕES: A freqüência de ALT >40U/L foi baixa e a de esteatose foi alta. As alterações ultra-sonográficas hepáticas não mostraram associação com o estado nutricional nem com os níveis de ALT. Por sua vez, triglicerídeos aumentados associaram-se com níveis mais elevados de ALT.

OBJECTIVE: To evaluate the prevalence of altered hepatic ultrasound and elevated serum alanine aminotransferase (ALT) in overweight and obese children, as well as to relate them to lipid peroxidation, lipid profile and insulin resistance. METHODS: A prospective, controlled, cross-sectional study was performed with 67 overweight and obese children (38 female, mean age of 8,6 years) paired by gender and age with 65 eutrophic controls. The following parameters were evaluated: lipid profile (LDL-c, HDL-c, triglycerides), ALT, lipid peroxidation measured by thiobarbituric acid reaction substance (TBARS), serum glucose and insulin resistance (Homeostasis Model Assessment). Hepatic steatosis was evaluated by ultrasound by a single professional and classified as diffuse mild, moderate or severe. RESULTS: Elevated ALT (>40 U/L) was observed in 3 percent and altered ultrasound in 57.4 percent of the overweight/obese children. Obese/overweight children showed a higher percentage of ALT >18 U/L (OR 4.2, p=0.0006) and hypertriglyceridemia (OR 4.2, p<0.001). ALT was associated with elevated triglycerides (OR 3,2; p=0,010). There was not association between TBARS (oxidative stress) or HOMA-IR with the presence of overweight/obesity or ALT >18 U/L. CONCLUSIONS: The frequency of altered ALT (>40U/L) was low and of altered hepatic ultrasound was high. There was no association between fatty liver at ultrasound with nutritional status or ALT levels. Elevated triglycerides were associated with higher levels of ALT.